01 檢測原理

02 適用樣本

• 糞便內容物、腸道組織黏附液（最主流）

• 血清、血漿、細胞上清、菌群發酵液

• 腸道灌洗液、動植物組織勻漿樣本

03 科研應用場景

• 腸道菌群代謝功能分析，菌群結構與代謝表型關聯驗證

• 藥物干預后SCFA譜變化，評價腸道微生態調控藥效

• 代謝疾病、腸道炎癥、免疫紊亂機制研究

05 核心儀器參數（通用標準）

• 升溫程序：初始40℃保留2 min，10℃/min升至150℃，20℃/min升至250℃，恒溫保留5 min

• 質譜模式：EI源70 eV，SIM選擇離子監測模式（靶向定量專屬）

• 溫度參數：離子源230℃，傳輸線280℃，四級桿150℃，溶劑延遲6 min

06 結果判讀與定量邏輯

07 關鍵實驗注意事項

• pH是萃取核心關鍵：SCFA為弱酸，必須酸化樣本使脂肪酸完-全游離，否則大量離子態SCFA無法被有機溶劑萃取，結果嚴重偏低、重復性差。

• 衍生化必須無水環境：水分會徹-底水解衍生化試劑，導致衍生失敗、目標峰消失、基線雜亂，萃取后必須經無水硫-酸鈉充分脫水。

• 樣本極易降解，需低溫速凍保存：取材后立即液氮速凍、-80℃避光保存，反復凍融會導致SCFA揮發降解、組分比例失真。

• 同分異構體分離難度高：必須使用FFAP專用脂肪酸柱，普通非極性柱無法區分異丁酸/正丁酸、異戊酸/正戊酸，出現峰重疊、定量不準。

• 嚴格采用內標校正：基質效應、萃取損耗、衍生效率波動大，氘代內標可完-美抵消系統誤差，是精準定量的必要條件。

• 上機樣本現制現測：衍生后產物不穩定，長時間放置會降解、氧化，導致峰面積衰減，需衍生完成后立即上機檢測。

• 杜絕交叉污染：高低濃度樣本分開上機，間隔插空白溶劑針清洗管路，避免殘留導致定量假偏高。

08 技術優缺點